NMPA+WHO+MIQE指南方法学通用

PCR实验室污染防控体系 — 分区/UV/UNG酶/气溶胶/质控全维度防御

发布日期:未知
文档来源:NMPA+WHO+MIQE指南
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概述

PCR实验室污染防控体系: 一、物理分区(最根本/法规强制):至少三个独立区域:试剂准备区(一区+正压+超净台)→样本制备区(二区+负压+生物安全柜)→扩增区(三区+负压)。各区独立空调(严禁串风)。各区专用工作服/鞋套/手套(单向流动:一区→二区→三区,不可逆行)。区与区之间传递窗(UV消毒+双门互锁)。 二、UNG酶防污染体系(dUTP+尿嘧啶-N-糖基化酶):原理:PCR用dUTP替代dTTP→扩增产物含尿嘧啶。新反应前加UNG酶37°C 2~10min→UNG切割尿嘧啶→产物的DNA链断裂→无法再扩增。UNG 95°C 2min灭活→天然模板(dTTP含胸腺嘧啶无尿嘧啶)不受影响继续扩...