Eiken+NEB+WHO+Notomi(2000)方法学通用
LAMP等温扩增技术全解析 — 引物设计/反应体系/比色判读/POC应用全流程
发布日期:未知
文档来源:Eiken+NEB+WHO+Notomi(2000)
原文件:未上传
概述
LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)技术全维度: 一、原理:用4~6条特异性引物(识别6~8个区域)→链置换DNA聚合酶(Bst聚合酶)→等温60~65℃下恒温扩增30~60min→产生阶梯状/花椰菜状DNA产物。引物四件套:F3/B3(外侧引物)+FIP/BIP(内引物,各含两个互补序列)→形成环状引物结构→自循环扩增。额外添加Loop-F/Loop-B环引物→缩短反应时间至15~30min。 二、引物设计六原则:1)GC含量40~60%(FIP/BIP≤60%)。2)3'端及5'端稳定性:dG≤-4kcal/mol(3')。3)F2/B2...