Sherlock+Chen(2018)+Broughton(2020)+NMPA方法学通用
CRISPR-Cas12/13反式切割+胶体金LFA联用技术 — 原理/反应体系/灵敏度提升/POC应用
发布日期:未知
文档来源:Sherlock+Chen(2018)+Broughton(2020)+NMPA
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概述
CRISPR-胶体金LFA联用技术全维度: 一、核心原理:CRISPR-Cas12a(Cpf1)/Cas13a(C2c2)特异性识别靶标dsDNA/RNA→激活反式切割(trans-cleavage)→非特异性切割单链ssDNA/ssRNA报告探针。报告探针:FAM-ssDNA-Biotin(被切割后FAM与Biotin分离)。LFA胶体金条:抗FAM金标抗体→T线链霉亲和素(捕获完整的FAM-ssDNA-Biotin)→C线抗鼠IgG(捕获金标抗体)。信号模式:Cas无活性(Sensor未识别靶标)→探针完整→金标-FAM→Biotin→T线SA捕获→T线强(无靶标)。Cas被靶标激活→探针...