金开瑞+Cloud-Clone+CNKI方法学通用
【竞争法】小分子半抗原偶联:载体蛋白/EDC碳二亚胺/戊二醛/马来酰亚胺法四方案对比
发布日期：未知
文档来源：金开瑞+Cloud-Clone+CNKI
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概述
小分子半抗原(<1000Da)必须偶联载体蛋白才能产生抗体。一、三大载体蛋白对比:BSA(67kD/30~35个自由氨基/成本低/最常用,但ELISA检测时需注意BSA封闭假阳性);KLH(450~1300kD/免疫原性极强/效价高10倍以上/成本高,首选免疫原);OVA(45kD/常作为第二载体蛋白用于ELISA包被以区分抗载体抗体)。标准策略:KLH偶联物免疫→BSA/OVA偶联物包被筛选。二、碳二亚胺法(EDC法):EDC+NHS激活羧基→与氨基形成酰胺键。适用:含-COOH的半抗原。特点:零长度交联不引入间隔臂,对半抗原结构影响小。条件:pH6~8(最适7),室温1~2h后再放置24h...