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竞争法小分子检测灵敏度提升六策略 — 偶联比/异源抗原/半抗体/非竞争法

发布日期:未知
文档来源:J Pharm Biomed Anal+Food Chemistry+Chem Eng J+Current Biotech
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概述

免疫层析竞争法小分子检测灵敏度提升策略(从易到难): 策略一提高偶联比(最简单/提升2.5倍):竞争抗原偶联比CR从1.3→7.9,IC50从13.45→5.32ng/mL。原理:高偶联比→抗体亲和力强→用量少→位阻小→微量靶标即可竞争。用MALDI-TOF-MS确认偶联比。建议尽可能制备CR>7的竞争抗原。 策略二异源抗原HEA(提升4~7.7倍):使用与靶标结构类似但抗体交叉反应低的类似物作包被抗原→异源抗原与抗体结合弱于同源→增强靶标竞争能力。筛选方法:交叉反应率初筛+计算机辅助分子模拟+实验验证。吡虫啉(IMI)检测用异源抗原+AIE荧光→LOD 0.12ng/mL(7.7倍提升)。 ...