专利CN112557674A+生物谷/丁香通方法学通用

【包被】抗体浓度优化与包被稀释液配方

发布日期:未知
文档来源:专利CN112557674A+生物谷/丁香通
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概述

一、T线包被抗体浓度优化:浓度范围:0.5~3.0mg/mL。梯度设计:0.5/1.0/1.5/2.0/3.0mg/mL各一点,实测T线灰度值。过低:信号不足T线浅。过高:NC膜孔径堵塞、层析速度下降、非特异结合增加。二、C线质控抗体浓度:常用0.3~1.0mg/mL,羊抗鼠/兔IgG或ProteinA。三、包被稀释液标准配方:PBS 0.01M pH7.4+海藻糖1%(w/v)保护抗体活性。增强型:加BSA1~5%封闭+Tween-20 0.5~1%使分布更均匀+NaCl 1%调节离子强度。四、划线参数:划膜仪0.7~1.0μL/cm,速度300mm/s,C-T线间距5~6mm。五、干燥:2...