抗体-抗原反应动力学对免疫层析灵敏度的影响 — koff最关键/亲和力选型指南

抗体-抗原反应动力学对免疫层析灵敏度的影响: 一、核心参数:结合速率kon(M⁻¹s⁻¹)越大结合越快。解离速率koff(s⁻¹)越小越稳定。平衡解离常数KD(M)=koff/kon(越小亲和力越高)。平衡结合常数KA=1/KD=kon/koff。抗体典型值:kon=10⁴~10⁶M⁻¹s⁻¹/koff=10⁻²~10⁻⁵s⁻¹/KD=10⁻⁷~10⁻¹²M(nM~pM级)。 二、免疫层析灵敏度的最关键参数是koff(不是KD!):Dinh 2016(Analytical Chemistry)实验证明:检测抗体koff<10⁻⁵s⁻¹时荧光信号最高。捕获抗体koff<10⁻³s⁻¹即可。kon...