生物谷+专利+丁香园方法学通用
【标记】抗体标记量、标记pH与标记方法详解
发布日期：未知
文档来源：生物谷+专利+丁香园
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概述
一、最适标记pH(最核心参数):原则:pH略高于抗体等电点(pI)。实测值:IgG多抗pH9.0;单抗pH8.2;亲和层析抗体pH7.6;SPA pH5.9~6.2;ConA pH8.0;亲和素pH9.0~10.0;链亲和素先调pH4~6.5反应后缓慢复碱至7.5。调节:0.1M K₂CO₃或0.1M HCl,用Whatman精密pH试纸(禁用pH计防电极堵塞)。二、最适蛋白量(NaCl破坏试验):10管各1mL金液+抗体梯度5~50μg/mL→各加0.1mL 10% NaCl→静置2h→仍红色管对应最低稳定量。实际标记量=最低量×1.1~1.2(加安全系数)。参考值:夹心法10~20μg/m...