CLSI/NMPA+通用教科书方法学通用

酶联免疫吸附试验(ELISA)技术要点 — CLSI + NMPA

发布日期:未知
文档来源:CLSI/NMPA+通用教科书
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概述

酶联免疫吸附试验(ELISA)技术要点: 基本原理:固相载体包被抗原/抗体→酶标记抗体→底物显色→酶标仪读数 主要模式: 双抗夹心法:包被Ab1→样本Ag→酶标Ab2(大分子,≥2个表位) 竞争法:包被Ag+样本Ag竞争结合酶标Ab(小分子半抗原) 间接法:包被Ag→样本Ab→酶标抗人IgG(抗体检测为主) 关键工艺参数: - 包被条件:碳酸盐缓冲液pH9.6,4℃过夜或37℃2h - 封闭:1~5% BSA或脱脂奶粉,37℃1h - 酶标二抗稀释度:1:5000~1:20000 - 底物:HRP用TMB,ALP用pNPP - 终止液:2M H₂SO₄(TMB),3M NaOH(pNPP) 性...